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      邁博瑞 s

      印跡膜有什么特點

      標簽: 轉印膜

      生物印跡技術是將待測生物大分子結合到一定固相支持物(微濾膜)上的方法。主要印跡技術有Northern印跡、Southern印跡。生物印跡技術中的印跡膜是專門用于分離和檢測生物分子(如蛋白質、核酸、細胞等)的材料。

      目錄

      1、Northern印跡、Southern印跡、Western印跡區別對比

      2、印跡膜特性

      • 印跡膜作為印跡技術中的重要固相支持物的主要特性
      • NC印跡膜、尼龍印跡膜和PVDF印跡膜的區別

      3、印跡膜性能驗證

      4、邁博瑞印跡膜參數

       

      一、Northern印跡、Southern印跡、Western印跡區別對比

       

      Southern blot

      Southern blot

      Northern blot

      Northern blot

      Western blot

      Western blot

      定義

       用于識別特定DNA序列的程序 

      Southern blot的改編,通過與互補DNA的雜交來檢測特定RNA序列

      用于鑒定蛋白質中特定氨基酸 序列的印跡程序

      開發者

      1975年,愛德華

      1977年,詹姆斯.阿爾溫等人

      1979年,喬治.斯塔克

      檢測到的分子類型

      特異性DNA序列

      特異性RNA序列

      特定蛋白質

      電泳

      瓊脂糖凝膠電泳

      甲醛瓊脂糖凝膠電泳

      SDS PAGE/聚丙烯酰胺凝膠

      印跡程序

      毛細管轉移

      毛細管轉移

      電動傳輸

      探針

      DNA探針

      cDNA探針

      一抗和二抗

      樣本制備

      變性處理

      自然狀態

      自然狀態

      應用

      檢測給定樣品中特定DNA序列
      親子鑒定、DNA指紋圖譜
      受害者識別、識別犯罪
      遺傳疾病和傳染因子檢測
      基因重排突變和鑒定

      識別給定樣品中特定RNA序列
      有助于疾病的檢測
      基因表達研究

      識別給定樣品中的蛋白質數量
      檢測血清中病毒或細菌存在
      檢測有缺陷的蛋白質
      用作某些疾病診斷的明確措施

      檢測系統

      放射自顯影、光檢測和顏色變化

      放射自顯影、光檢測和顏色變化

      檢測光線和顏色變化

       

      二、印跡膜特性

      1、印跡膜作為印跡技術中的重要固相支持物的主要特性

      名稱

      特點

      NC 印跡膜

      無支撐布

      不添加洗滌劑

      100% 純硝化纖維

      高蛋白結合能力

      毛細管率與厚度一致

      背淺

      PVDF 印跡膜

      耐化學性

      無變色

      非易燃

      高強度

      疏水性

      背景淺

      高蛋白結合

      尼龍印跡膜

      親水性

      高強度

      高化學耐受性

      高蛋白結合力

       

      2、NC印跡膜、尼龍印跡膜和PVDF印跡膜的區別

       

      正電尼龍印跡膜

      硝酸纖維素印跡膜

      PVDF印跡膜

      DNA或RNA截留力

      480-600ug/cm2

      80-100ug/cm2

      125-300ug/cm2

      蛋白截留力

      500ug/cm2

      80-100ug/cm2

      100-300ug/cm2

      結構強度

      柔韌、耐化學試劑,可重復剝離

      膜脆、易破碎,不可重復使用

      強度高、耐高溫、可重復剝離

      吸附力

      電荷和疏水作用

      疏水作用和電荷

      疏水作用和電荷

      是否需活化

      無需活化

      無需活化

      需要活化

      檢測方法

      放射性標記探針
      酶抗體偶聯物(化學發光、顯色、化學熒光)

      放射性標記探針
      直接染色,熒光
      酶抗體偶聯物(化學發光、顯色)

      直接染色
      酶抗體偶聯物(化學發光、顯色)

       

      三、印跡膜性能驗證

      • 印跡膜對生物分子的最大吸附能力驗證
      • 印跡膜轉印生物分子效果驗證
      • 印跡膜轉印燒穿檢測驗證
      • 轉印膜背景及靈敏度(最低檢測限度)驗證
      • 轉印膜吸附生物分子作用力(疏水和電荷)驗證

       

      四、邁博瑞印跡膜參數 

      名稱 濕潤性 靈敏度和分辨率 背景 機械強度 溶劑耐受性 水潤性 蛋白結合能力 適用染色方法 檢測方式
      Nylon66印跡膜 親水性 較高 軟而結實 較差 緩沖溶液潤濕 >400μg/cm2 不能用陰離子染料 不能用陰離子染料,受限制
      NC轉印膜 親水性 干的NC膜易脆 緩沖溶液潤濕,避免氣泡 80-110μg/cm2 膠體金、麗春紅、酰胺黑、印度墨汁 常規染色,可用放射性和非放射性檢測
      PVDF轉印膜 疏水性 機械強度高 100%的甲醇潤濕 125-200μg/cm2 膠體金、麗春紅、酰胺黑、印度墨汁、考馬斯亮蘭 常規染色,較于NC膜可用考馬斯亮藍染色,ECL檢測和快速免疫檢測

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